SPR親和力測(cè)定服務(wù)
基于表面等離子體共振SPR原理為客戶提供準(zhǔn)確、快速的親和力測(cè)定服務(wù)。表面等離子體共振 (SPR親和力測(cè)定)測(cè)定是一種基于光學(xué)的無(wú)標(biāo)記檢測(cè)技術(shù),用于實(shí)時(shí)檢測(cè)兩個(gè)或多個(gè)分子之間的分子互作。SPR親和力測(cè)定的平臺(tái)吞吐量、靈活性和靈敏度使研究人員有可能在任何結(jié)合中研究,包括:抗原抗體親和力檢測(cè),蛋白與小分子、多肽親和力檢測(cè),蛋白與小分子藥物的親和力檢測(cè)等。可以研究范圍廣泛的分子,從離子、片段和小分子到蛋白質(zhì)和病毒。 為客戶提供1-2周的快速親和力檢測(cè)周期,為客戶提供準(zhǔn)確、有效的親和力測(cè)定數(shù)據(jù),為客戶的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目提供強(qiáng)有力的保障。
表面離子共振(SPR)
表面等離子體共振 (SPR)親和力測(cè)定是一種基于光學(xué)的無(wú)標(biāo)記檢測(cè)技術(shù),用于實(shí)時(shí)檢測(cè)兩個(gè)或多個(gè)分子之間的分子互作。SPR親和力測(cè)定具有高通量、高靈活性、高靈敏度的特點(diǎn),可以用于早期的藥物研發(fā)以及臨床前藥物篩選。比如:篩選小分子藥物或多肽(酶或抗體等)具有強(qiáng)大的優(yōu)勢(shì)能夠快速、準(zhǔn)確地篩選出候選藥物分子為后續(xù)研究節(jié)省成本。
SPR親和力檢測(cè)是一種通過傳感器芯片跟蹤信號(hào)變化來檢測(cè)分子相互作用的方法。SPR信號(hào)通過折射率變化呈現(xiàn),它指的是響應(yīng)單位 (RU) 大約相當(dāng)于1pg/mm2的蛋白質(zhì)表面濃度。在兩個(gè)分子之間的相互作用過程中,隨時(shí)間繪制SPR信號(hào)會(huì)產(chǎn)生傳感圖,該圖可以實(shí)時(shí)可視(圖 1)。一般結(jié)合反應(yīng)包括三個(gè)階段:結(jié)合、平衡和解離;將這些傳感圖數(shù)據(jù)與數(shù)學(xué)模型擬合,科學(xué)家們可以計(jì)算關(guān)聯(lián) (Ka) 和解離 (Kd) 速率常數(shù),并最終確定結(jié)合親和力(KD)。與基于平衡點(diǎn)測(cè)量抗體結(jié)合親和力的等溫量熱法 (ITC) 不同,SPR可以獲得完整的動(dòng)力學(xué)參數(shù)來評(píng)估結(jié)合和解離的所有影響以及抗體親和力。
在抗體親和力測(cè)量中,待分析的抗體首先被固定在傳感器芯片表面的高親和力抗IgG 抗體捕獲。然后將一系列濃度的抗原依次注射到整個(gè)表面。根據(jù)傳感圖曲線,人們可以根據(jù)動(dòng)力學(xué)參數(shù)對(duì)抗體進(jìn)行排序,并選擇具有優(yōu)質(zhì)特性的單克隆抗體。與緊密結(jié)合抗體的發(fā)現(xiàn)相比,特定區(qū)域(表位)的鑒定在藥物發(fā)現(xiàn)中有前景,因?yàn)橥ㄟ^標(biāo)準(zhǔn)的蛋白工程方法可以使結(jié)合親和力成熟。因此,基于涉及兩種結(jié)合反應(yīng)的二價(jià)分析物模型,我們能夠提供分析來鑒定與兩種不同抗原表位結(jié)合的抗體。首先將通用抗體(如兔抗小鼠免疫球蛋白)共價(jià)連接到芯片表面,然后第一抗體被先前連接的通用抗體捕獲。不飽和位點(diǎn)被封閉后,注射的抗原將與第一抗體結(jié)合,形成Ab-Ag復(fù)合物。隨后施用于評(píng)估結(jié)合親和力的第二單克隆抗體,如果第二抗體結(jié)合不同的單獨(dú)表位,將觀察到特有的傳感圖曲線。

圖1 表面離子共振法原理圖
應(yīng)用范圍:
我們提供通過SPR分析研究的生物分子相互作用的服務(wù)。
通過SPR研究各種生物實(shí)體,包括小分子 (<100 Da) 、蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)、細(xì)菌、病毒和全細(xì)胞。大多數(shù)已發(fā)表的SPR研究涉及蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用,其中抗體-抗原相互作用代表了一個(gè)主要方向。我們提供高靈敏度的儀器和準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)方案,幫助客戶進(jìn)行小分子、脂質(zhì)和核酸的研究。蛋白質(zhì)與較大實(shí)體(如全細(xì)胞和一些細(xì)菌和病毒)的相互作用受到漸逝波指數(shù)衰減的限制。在實(shí)踐中,可以有效地研究這些大分子,但獲得的信息可能僅限于定性或半定量(例如,相對(duì)排序)數(shù)據(jù)。
1、小分子親和力測(cè)定(測(cè)定小分子和蛋白的結(jié)合力、親和力,小分子與蛋白互作,指導(dǎo)小分子藥物篩選)
2、抗原抗體親和力測(cè)定
3、蛋白與蛋白親和力測(cè)定
SPR親和力測(cè)定樣品要求:
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客戶提供
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要求
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客戶可提供抗體,蛋白,多肽,化合物小分子等樣品
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* 緩沖液:PBS,HEPPS等不含有機(jī)試劑,不含Tris
* 抗原樣品:蛋白(多肽)>2mg,濃度>0.5mg/ml,純度>90%
* 蛋白樣品(含抗體):>200ug,濃度>0.5mg/ml,純度>90%
* 多肽樣品:>200ug,濃度>1mg/ml,純度>90%
* 化合物小分子:>1mg,濃度>1mg/ml(干粉最佳)
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SPR親和力測(cè)定服務(wù)聯(lián)系:
聯(lián)系方式:18071542101
聯(lián)系郵箱:[email protected]